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壳聚糖纳米颗粒包裹猪白细胞介素2和融合白细胞介素4、6基因对猪圆环疫苗免疫的强化
nhancement of immune response to PCV-2 vaccine by porcine IL-2 and fusion IL-4/6 gene entrapped in chitosan nanoparticles
陈祎,宋婷玉,李金海,肖永乐,曾光志,万小平,杨璐一,方鹏飞,王泽洲,高荣
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DOI:
作者单位:四川大学,四川省华派生物制药有限公司;四川省动物疫病预防控制中心
中文关键字:猪,基因共表达,白细胞介素2,融合白细胞介素4/6,免疫,PCV-2疫苗
英文关键字:Piglet, gene co-expression, IL-2, fusion IL-4/6, immunity, PCV-2 vaccine
中文摘要:目的: 探讨猪融合白细胞介素4/6和猪白细胞介素2基因的共表达对仔猪免疫应答的影响,为进一步研制新型免疫调节剂来加强猪抵御断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)奠定基础。方法:将猪融合白细胞介素4/6和猪白细胞介素2基因的共表达重组质粒,用壳聚糖材料包裹制成纳米颗粒,记做VRIL4/6-2-CS。将仔猪分为两组,分别肌肉注射VPIL4/6-2-CS和生理盐水,两组均同时接种PCV-2疫苗,在接种后的0、7、14、28天采集血样并分析免疫变化。结果:接种VPIL4/6-2-CS的仔猪血清中的IgG2a抗体数量和血液中CD4+, CD8+ T淋巴细胞数量均显著高于对照组 (P<0.05);同时,VPIL4/6-2-CS接种组仔猪的IL-2, IL-4, IL-6, TNF-α, TLRs (TLR-2,7)基因表达水平也显著高于对照组 (P<0.05)。尽管两组之间PCV-2特异性抗体的含量并无显著差别,但是实验组仔猪的生长速率显著高于对照组 (P<0.05)。结论:VPIL4/6-2能促进仔猪对PCV-2疫苗的免疫应答,是一种安全有效的免疫佐剂。
英文摘要:Objective In order to develop a novel effective immunomodulator to enhance pig resistance against post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS), we used the recombinant plasmid co-expressing pig interleukin-2 (IL-2) and fusion interleukin-4/6 (IL-4/6) genes we constructed before, studied its effect on immune response of piglets. Methods The recombinant plasmid was encapsulated in chitosan (CS) nanoparticles prepared by the ionotropic gelation method, designated VRIL4/6-2-CS. Then piglets were divided into two groups and intramuscularly injected respectively with VPIL4/6-2-CS and saline along with the PCV-2 (pig circovirus-2) vaccine. The blood was collected from each piglet on days 0, 7, 14 and 28 after vaccination to assay the immunological changes. Results The number of IgG2a, CD4+, CD8+ T cells increased significantly in the sera or blood of piglets treated with VPIL4/6-2-CS (P<0.05). Furthermore, the expression levels of IL-2, IL-4, IL-6, TLRs (TLR-2, 7) and TNF-α elevated significantly in the treated piglets (P<0.05) over an 28 day observation period. Although there were no significant differences in PCV-2-specific antibody levels, the growth performance of the treated piglets was markedly improved in comparison with controls (P<0.05). Conclusion These indicate that VRIL-4/6-2 entrapped with CS is a promising effective adjuvant to promote the immune response of pig to PCV-2 vaccination.
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