《四川动物》

文章标题:Stella基因真核表达载体的构建及其对小鼠胚胎干细胞多能性的影响

文章作者:白耀富1#,刘维帅2#,华进联1*
关 键 字:胚胎干细胞;减数分裂;多能性
文章摘要:构建Stella基因真核表达质粒,转染小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cellsESC)并初步探讨Stella对减数分裂起始相关基因(Stra8)及胚胎干细胞多能性的影响。通过RT-PCR扩增目的基因,并连接至真核表达载体pEGFP-C1,利用重组质粒转染小鼠胚胎干细胞。对转染细胞进行荧光检测,确认Stella的表达,并利用免疫荧光及PCR检测转染细胞基因表达情况。酶切鉴定及测序分析表明成功构建含Stella基因的重组真核表达质粒,过表达StellaES细胞的增殖和形态学特征、进入减数分裂阶段的相关基因及其多能性基因的表达影响并不显著。故此得出结论:Stella在小鼠胚胎干细胞中能够正确表达,但对ES细胞的分化、Stra8基因的表达及其多能性基因的表达并无显著影响。